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《蜂膠總黃酮的抗氧化及抗腫瘤活性研究》-遼寧中醫藥大學

時間：2025-05-05來源：本站原創瀏覽：240

蜂膠是工蜂采集各種植物芽、葉中的樹脂等分泌物與其上顎腺、蠟腺等分泌物混合后形成的具有芳香氣味的黏性固體膠狀物。蜂膠作為傳統藥品和保健品使用歷史非常悠久。國內外研究表明，蜂膠具有抗病毒、抗氧化、抗腫瘤及免疫調節等廣泛的生物活性，蜂膠中存在多類化學成分，其中包括黃酮類、酚酸類、萜烯類化合物等主要藥效成分。

姚靜等采用LC-IT-TOF-MS法進行鑒別，發現中國蜂膠中含有高良姜素及酯類、槲皮素及酯類、短葉松素及酯類、白楊素等20余種黃酮類成分。

實驗研究表明，從多種天然藥物中得到的總黃酮類提取物具有清除自由基、抗氧化、抗菌、抗病毒、保護心腦血管和抗腫瘤等作用，近年來，蜂膠總黃酮（TFP）的藥理作用研究也廣受關注，但對其抗氧化和抗癌作用的研究報道較少。本實驗室前期研究表明，TFP具有顯著的血管舒張作用，對全腦缺血-再灌注大鼠腦損傷具有明顯的保護作用。

目的：研究蜂膠總黃酮（TFP）的抗氧化活性及其對小鼠肝癌Hepa1-6細胞、人肺癌A549細胞和人胃癌SGC7901細胞增殖的抑制作用。

方法：通過測定TFP的總還原力及對1，1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、羥基自由基和超氧陰離子自由基的清除能力，評價TFP的體外抗氧化活性；采用CCK-8法檢測蜂膠總黃酮抗腫瘤細胞增殖的能力。

結果：實驗結果表明，在25~150μg/mL濃度范圍內TFP具有較強的總還原力，對DPPH自由基、羥基自由基和超氧陰離子自由基的清除能力均呈現濃度依賴性增大，最大清除率分別為（72.47±3.13）%、（70.84±4.01）%和（68.24±4.56）%；50、100、200μg/mL的TFP對Hepa1-6、A549和SGC7901細胞的生長均有明顯的抑制作用，且在24~72h時間范圍內的抑制作用隨時間延長而逐漸增大。

結論：TFP在體外具有較強的抗氧化能力，且對Hepa1-6、A549和SGC7901細胞的生長具有顯著的抑制作用。

心腦血管系統、腫瘤等多種疾病和人類的自然衰老都與氧自由基密切相關。黃酮類化合物的抗自由基作用已經得到大量實驗證實，從天然藥物中篩選具有較強抗氧化活性的黃酮類化合物已成為新藥研究與開發重點關注的領域。總還原能力測定以及DPPH自由基、超氧陰離子自由基、羥基自由基等清除率測定是評價天然活性成分體外抗氧化活性的常用方法。DPPH是一種人工合成的比較穩定的含氮自由基，其乙醇溶液在517nm處有特征吸收，外加抗氧劑可與DPPH結合，使其顏色和吸光度發生變化，可用于評價抗氧劑清除自由基的能力。通過Fenton反應產生的具有高反應活性的羥基自由基可與水楊酸結合，生成在510nm處有強烈吸收峰的2，3-二羥基苯甲酸。

在體系中加入可清除部分羥基自由基的物質可減少吸收峰的形成，用分光光度法測定體系的吸光度值可反應自由基的含量，從而間接測定樣品的抗氧化能力。超氧陰離子是一類重要的活性氧自由基，可誘導大分子物質產生氧化損傷，因此通過測定對超氧陰離子自由基的清除作用可以評價物質的抗氧化能力大小。本研究以蜂膠總黃酮為對象，通過體外抗氧化實驗評價了蜂膠總黃酮的抗氧化能力。

實驗結果表明，蜂膠總黃酮具有較強的總還原能力，對DPPH自由基、羥基自由基、超氧陰離子自由基均具有較強的清除能力，并在一定范圍內呈現濃度依賴性，其EC50值分別為71.01、73.63、84.85μg/mL，但總還原能力和自由基清除能力均弱于Vc。蜂膠總黃酮的抗氧化能力可能與其含有的高良姜素、短葉松素、白楊素等成分能調節體內黃嘌呤氧化酶、過氧化物酶、環氧合酶-2、誘導性一氧化氮合酶等活性物質有關。

腫瘤是臨床發病率和病死率均較高的疾病之一，目前臨床使用的多數抗癌化療藥物毒性均較大，因此，開發高效、低毒的天然抗腫瘤藥物已成為重要研究方向。近年來研究表明，多種天然藥物中提取出的黃酮類化合物具有明確的抗腫瘤活性，其作用機制可能涉及誘導腫瘤細胞凋亡、清除自由基、抑制腫瘤血管生成等多種途徑。本實驗在研究蜂膠總黃酮抗氧化活性的基礎上，采用CCK-8法探討了蜂膠總黃酮對3種腫瘤細胞生長的抑制能力。

研究結果表明，蜂膠總黃酮對Hepa1-6、A549和SGC79013種腫瘤細胞生長均具有顯著的抑制作用，且在總黃酮濃度50~200μg/mL范圍內、作用時間24~72h范圍內呈現出明顯的濃度和時間依賴性，200μg/mL蜂膠總黃酮在作用72h后對Hepa1-6、A549和SGC7901細胞的抑制率分別達到了（78.62±2.49）%、（84.68±3.45）%和（88.31±3.81）%。

腫瘤的發病機制眾多，有研究發現氧自由基與腫瘤的發生密切相關，較多的致癌物在體內經過代謝活化后形成自由基，在腫瘤發生過程中占有非常重要的角色，有效地控制自由基也是防止癌變的重要措施之一。因此，可以推測蜂膠總黃酮對腫瘤細胞增殖的抑制作用也可能與其抗氧化活性有關。

綜上所述，蜂膠總黃酮具有較好的體外抗氧化活性，總還原能力較強，對DPPH自由基、羥基自由基、超氧陰離子自由基具有較高的清除能力，而且蜂膠總黃酮能抑制腫瘤細胞的生長，對Hepa1-6、A549和SGC7901細胞增殖抑制作用均較強。

（來源：蜂膠總黃酮抗氧化和抗腫瘤活性研究，遼寧中醫藥大學學報. 2020,22(12)）作者王啟海1，左堅2，梁楓1，裴文俊3，張夢雨1（1.安徽中醫藥高等專科學校，安徽?蕪湖?241002；2.皖南醫學院附屬弋磯山醫院，安徽?蕪湖?241001；3.皖南醫學院安徽省重點實驗室，安徽?蕪湖?241002）

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